黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素三合一免疫金标速测卡使用说明书

【产品简介】

本产品用于快速检测粮食、谷物以及饲料中黄曲霉毒素B1(AFB1) 、玉米赤霉烯酮(ZEN) 、呕吐毒素（DON）残留，灵敏度分别为：黄曲霉毒素B1 3 μg/kg、玉米赤霉烯酮50 μg/kg、呕吐毒素1000 μg/kg，整个检测过程只需要5分钟，适用于各类企业及检测机构。

【检测原理】

该速测卡应用竞争抑制免疫层析的原理，样本中的真菌毒素在侧向移动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和NC膜检测线上抗原－BSA偶联物的结合。如果样本中黄曲霉毒素B1含量大于3 μg/kg、玉米赤霉烯酮含量大于50 μg/kg、呕吐毒素含量大于 1000 μg/kg，则对应检测线不显颜色，结果为阳性。反之，检测线显红色，结果为阴性。

【样品处理】

粮食、饲料等

1、称取2 g粉碎均匀的样品（过20目筛）置于50 mL离心管中，加入10  mL甲醇/水溶液（7:3），振荡15 min，静置2-3 min至析出上清液（建议室温下4000 rpm离心3 min）。

2、取上清2 mL于玻璃试管中，在65 ℃下氮气吹干。

3、于玻璃试管中加入 500 μL 正己烷，吹打液体润洗内壁四周，使固体完全溶解，再加入 300 μL PBS缓冲液，振荡1 min充分混匀。

4、室温下 4000 rpm 离心 1 min取下层溶液3滴，待检。

【使用步骤】

（1）测试前请完整阅读使用说明书，并将未开封的速测卡和待检样本溶液回复至常温；

（2）从包装袋中取出速测卡后请尽快使用；

（3）将速测卡平放，用滴管吸取待检样品溶液，滴加3滴(约75 μL) 于加样孔中，加样后开始计时；

（4）结果应在5-8分钟读取，其他时间判读无效；

（5）读取结果时，速测卡水平置于观察者正面，如左图所示。

【结果判断】

 阴性（－）：AFB1/ZEN/DON线显色（测试线，靠近加样孔一端），表明样品中对应真菌毒素的浓度低于临界值；或者不含对应真菌毒素残留。

 阳性（＋）：AFB1/ZEN/DON线无显色，表明样品中对应真菌毒素的浓度高于临界值；

 无效：未出现C线，可能操作不当或速测卡已失效。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的速测卡重新测试。

【注意事项】

（1）请勿触摸速测卡中央的白色膜面，请勿使用过期的速测卡；

（2）本公司提供的滴管请勿重复使用，本公司提供的试剂请勿食用；

（3）若需直接检测标准品，请用我方提供的PBS缓冲液进行配制；

（4）自来水、蒸馏水或去离子水不能作为阴性对照；

（5）由于样本的差异，有的检测线颜色可能偏淡或偏灰，但只要出现条带，就可判定为阴性结果；

（6）出现阳性结果，建议用本卡复查一次。气质联用法是真菌毒素检测的确证方法；

（7）样本中的固体杂质颗粒会导致假阳性结果，取样时弃去肉眼可见的颗粒部分，有条件时请离心后取清液做检测。

【精密度】

同时用本产品和呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素B1的ELISA检测试剂盒对包括56份阴性样本和60份阳性样本的116份样品进行检测，结果表明本产品与呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素B1 ELISA检测试剂盒的结果符合率为98.1％。

【储存及有效期】

原包装在4-30 ℃阴凉避光干燥处储存，有效期为12个月，批号和有效期见包装盒。